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浅谈移液器的操作规范与校正方法

编辑:永利电玩城????来源:未知????发布时间:2018-08-27 15:06????浏览量:
0 引言
移液器作为定量转移溶液的计量器具,因其具有取样准确、简单轻巧、使用方便等优点,在生物、化学、医学等领域得到广泛应用。移液器容量的准确性直接影响数据结果,因此为了保证移液器的准确、可靠,必须定期对其进行永利电玩城官方网站。目前国内主要采用JJG646 -2006《移液器》规程中的衡量法作为移液器的校正方法,校正人员不仅要遵循良好的操作规范,还要能够对不同类型的移液器在校正中遇到的问题做出正确的判断,给出合理的解决方案。

1 移液器校正操作规范
 
1. 1 移液器校正前准备
1. 1. 1 移液器的分类和校正点的选择移液器按照工作原理可以分为空气置换式移液器和外置活塞移液器。空气置换式移液器的活塞位于产品内部,使用时试剂与活塞之间形成一段空气柱,当活塞在移液器内向上移动时产生局部真空,试剂被吸入吸头内,填满该部分真空产生的既定体积的空间。外置活塞移液器的活塞位于吸头中,活塞与样品直接接触,当活塞向上移动时样品被吸入毛细管内,适用于高蒸汽压与高粘度的液体移液。它又可以分为只能预装一种规格吸头的外置活塞移液器和可以预装多种不同规格的分液管的电子连续分液器。JJG646 - 2006《移液器检定规程》中的检定对象是空气置换式移液器,外置活塞移液器的校正方法需要参照国际标准 ISO8655 - 2:2002《活塞式容积测定仪器》,不同类型移液器的校正点和参考标准见表 1。.
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 1. 2 移液器校正用电子天平的选择
JJG646 -2006《移液器检定规程》中要求移液器校正实验室配置分度值为 0. 001mg、0. 01mg 和0. 1mg 的电子天平,但是没有说明检定不同规格的移液器时应该选择分度值为多少的天平。可以参考国际标准 ISO8655 - 6《活塞式容积测定仪器》中列出的不同精度电子天平的选择方法,详见表 2。校正 V≤10μL 的移液器需要配置百万分之一的天平,为了防止介质蒸馏水在校正过程中的挥发影响这类微量移液器的校正结果,天平需要配备防蒸发阱。1.
 
1. 3 移液器校正环境和介质
校正移液器的实验室要满足室温为 (20 ±5)℃,室温变化不得大于 1℃ /h,检定介质蒸馏水或去离子水应提前 24h 放入实验室,移液器应提前 4h放入实验室。
 
1. 1. 4 移液器吸头的选择和安装
移液器和吸头是一个完整体系,只有来自同个厂家才能保证结果的准确度和精密度,在校正和日常使用移液器时一定要选择配套的同厂家的吸头。使用微旋安装法安装吸头,将移液器吸嘴垂直插入吸头,小幅度旋转轻压上紧。禁止上下敲击或左右摇晃,避免吸头变形和吸嘴在强力摩擦下的磨损,有些微量移液器的吸嘴较细,用力敲击可能会损坏吸嘴。
 
1. 1. 5 移液器的密合性检查移液器的密合性是否正常直接影响结果的准确度。在保证移液器使用的是同一厂家的配套吸头并且吸头旋紧后,可以采用简单目测法检测移液器的气密性。200ul 以下的移液器,将吸头浸入液面(1~2)mm,静待 20s,观察吸头内液面是否下降,如果下降说明移液器存在漏液现象。1000ul 以上的移液器,吸液后离开液面垂直放置 20s,观察吸头尖端是否有液体下滴,如果有说明移液器存在漏液现象。
 
1. 2 移液器校正步骤
(1)选择大小合适的有盖称量杯放入电子天平中,天平清零。
(2)调节移液器的量程,旋转刻度调节旋钮,从大量程调节至小量程,精度最佳;从小量程调节至所需的大量程后,继续旋转刻度调节旋钮约 1/3 圈,再返回。
(3)预润洗吸头至少三次,在吸头内部形成同质膜,提高移液准确度,保持一致的重复性,若未预润洗,实际的移液体积将偏低于设定体积,影响校正结果。
(4)吸液时移液器要保持垂直,根据流体静力压原理,移液器斜着吸液将使体积偏大。吸头浸入液体的深度既要避免液体残留在吸头表面,又要保证不能随着吸液液面下降而吸入空气。吸头浸入深度与移液器的规格有关,见表 3。
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(5)吸液和排液时速度应该缓慢均匀,提高移液精准性。在使用电动移液器时,应该设置合适的吸液和排液速度,避免过快的操作对结果造成影响。吸液时按到第一停止点,缓慢释放按钮,保持吸头浸入液面至少1s,对5ml 和10ml 这种大量程移液器应该停顿(2 ~ 3)s,然后将移液器缓慢移开液面。从天平中拿出称量杯,排液时吸头尖端靠壁并成 45°,缓慢下压活塞至第一停止点,等待(1 ~2)s,继续下压活塞按钮,到达第二停止点。
(6)将称量杯放到天平中称重,待天平读数稳定后读数。重复操作六次,计算移液器每个校正点的容量相对误差和重复性。(7)移液结束后应将移液器调整到最大量程,保护弹簧。长时间的移液操作后手温使移液器变热,移液器的内部空气膨胀。为了保证移液器的温度与水温和室温达到平衡,在实验过程中建议佩戴手套,两次移液操作之间将移液器放回支架上。
 
2 移液器的容量校正
采用衡量法校正移液器,当校正点容量相对误差超出参考标准规定的允差范围时,如果移液器属于外置活塞式,因其结构比较复杂,不建议自行校正;如果移液器属于空气置换式,校正人员可以根据移液器结构和实验室条件对移液器容量进行调整。调整一个校正点同时会影响另外两个校正点的容量,因此建议从最小点开始调整,调整后再用衡量法校正,判断三个点的容量相对误差是否都满足参考标准规定的容量允许误差。不同品牌的空气置换式移液器因为结构不同,容量调整方法也各不相同,见表 4。
 
3 结束语
移液器的种类日渐多样,实验人员应根据不同类型的移液器选择合适的校正点和电子天平标准器,使用同厂家的移液器吸头和正确的移液操作,定期对移液器容量进行校正,以保证其容量的准确性与一致性。当移液器示值超差时应先检查移液器的密合性是否正常,然后判断可否在实验室自行进行校正,经校正后再重新采用衡量法进行永利电玩城官方网站。

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