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洗板机的仪器设备校验方法研究

编辑:永利电玩城????来源:未知????发布时间:2018-08-08 13:47????浏览量:

仪器设备校验

洗板机是专门清洗酶标板的,一般和酶标仪配套使用。已经广泛地被用于医院、血站、卫生防疫站、试剂厂、研究室的酶标板清洗工作。采用国际上最先进的无正负压技术开发的新型洗板机,避免了正负压带给您的麻烦,使您用得轻松、省时省力;多种清洗方式,可适用不同的实验要求.
 
一、自动洗板机的应用及原理
 
酶联免疫吸附测定(简称ELISA)主要是基于抗原或抗体能吸附至固相载体的表面并保持其免疫活性(称为包被),抗原或抗体与酶形成的酶结合物仍保持其免疫活性和酶催化活性的基本原理。在测定时,把受检标本(测定其中的抗体或抗原)和酶标抗原或抗体按不同的步骤与固相载体表面的抗原或抗体起反应,通过洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与其他物质分开,最后结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量有一定的比例,加入酶反应的底物后,底物被酶催化变为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,根据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。
 
洗板是分离已结合的抗原抗体复合物与其他未结合物质的过程,自动洗板机由微电脑控制,可以自动完成各种酶联免疫吸附测定用微孔板(以下简称“酶标板”)清洗工作的专用仪器,主要目的是除去微孔中未反应的抗原、抗体及未结合的酶标记物,以保证最终的显色与待测抗原、抗体之间的相关性。与酶标仪配套使用,达到临床检验的目的。ELISA方法同时决定了洗板对于整个实验的重要性。洗板,不仅影响实验的准确性,而且涉及实验的重复性,所以是室内质控和室间质评的重要考查内容。自动洗板机广泛应用于医院、血站、疾病预防控制中心、试剂厂、研究室的酶标板清洗工作。
 
自动洗板机一般由清洗液瓶、电磁阀、泵、分配针(分配头中细金属管)构成分配路径。清洗液首先用泵从清洗液瓶中抽出,通过电磁阀控制分配量,然后再排向分配头, 经分配头的分配针排入酶标板的微孔;由吸液针(分配头中较粗的金属管)、废液瓶、真空泵构成吸液路径。通过真空泵产生的负压经由废液瓶到达吸液针,微孔内的液体在大气压的作用下进入废液瓶;由数字电路、显示器、键盘、酶标板载物台(工作台)构成控制显示系统。达到设定工作程序、显示设置参数、控制分配量、清洗次数、浸泡时间、延迟时间、吸液时间、自动预洗间隔时间等自动清洗功能。
 
二、自动洗板机的校验
 
1.主要计量特性
 
(1)残液量:≤2μL/孔。
 
(2)加液误差:整板加液每孔300μL时,≤±5%。
 
(3)加液重复性:整板加液每孔300μL时,CV≤5%。
 
2. 仪器设备校验条件
 
(1)环境条件
 
实验室温度为(20±5)℃,室内温度变化≤1℃/h,无强电磁场干扰,无风、无振动,无强光直接照射,平坦、坚固的检测工作平面。
 
(2)测量用介质
 
测量用洗涤液采用GB6682-2008《分析实验室用水规格和实验方法》要求的蒸馏水或去离子水,其温度与室温之差≤2℃。
 
(3)测量标准及其他设备
 
测量标准必须经法定技术机构检定合格且在检定周期内。测量标准如表1所示。
 
3. 仪器设备校验项目和仪器设备校验方法
 
(1)校验前准备
 
测量清洗液水温, 查出相应的密度值(JJG18-2008附录A),自动洗板机设置为非震荡模式,采用差重法进行测量。
 
(2)外观及工作正常性检查
 
由于自动洗板机利用气压的原理进行工作,检查废液瓶的瓶口、所有的管路部分必须密封。检查各分配管、抽样管无因冲洗液结晶而造成堵塞;通过检查酶标板各列的分配量是否均匀, 排除分配针的堵塞;通过检查酶标板各列的残液量是否明显高于其他列,排除吸液针的堵塞;检查仪器的酶标板设置应与实际检测用的酶标板一致, 避免造成分配头损坏的危险。仪器处于正常工作状态。
 
(3)残液量
 
使用吸水纸吸附酶标板微孔底部的水分,称重酶标板空板(以下简称“空板”),记录空板重量W1。仪器设定加液量为300μL,整板加冲洗液后浸泡30s,吸液;再次称重,记录空板重量W2。重复测量3次,按式(1)计算残液量。
 
式中:Vr——清洗后酶标板每孔残液量,μL;W1——清洗前酶标板空板的质量,mg;——清洗后酶标板空板的质量平均值,mg;n——酶标板孔数,个;ρw——纯水(清洗液)在温度t℃时的密度,g/cm3。
 
(4)加液误差与重复性
 
仪器设置为浸泡不吸液模式。按二、3(3)的方法,称重记录加液前空板重量W1。整板每孔加入300μL冲洗液,不吸液再次称重,记录加液后酶标板的重量W2,按式(1)计算加液量。吸液后重复加液、吸液6次,分别记录加液前、吸液后酶标板重量W1i、W2i,计算加液量的平均值,按式(2)计算加液误差,按式(3)计算加液重复性。
 
式中:Srel(V)——加液量重复性,%;Vi——加液量第i次测量值,μL;n——测量次数,n=6。
 
4.校验中应注意的问题
 
由于自动洗板机的某些测试项目所使用的材料存在生物危险性,工作时必须放下防护罩。检测校验人员操作自动洗板机时,必须穿防护服、戴橡胶手套和眼镜。不要让手或身体其他部位接触到医疗机构现场的试剂或病人样本, 每次校验结束后务必洗手,避免病毒感染。
 
从工作台上放置或取下酶标板的操作,自动洗板机必须处于待机状态,以免发生意外导致仪器损坏。
 
为了保证自动洗板机的性能可靠,酶标板应平稳可靠放置在工作台中间,清洗中应注意保护分配头并注意与酶标板的位置是否偏移,避免导致分配量不准确、清洗液溢出、损坏分配头等严重后果。
 
仪器设备校验过程中不选用震荡模式, 尽量避免沾带水分,取出酶标板后称量应迅速,以减少清洗液的蒸发。实验证明,在稳定环境中,30s的测量时间对称量结果的影响可忽略不计。
 
仪器工作时及时检查废液瓶中的废液,在废液超出2/3时将废液倒掉;检查清洗液瓶中的洗液,如果低于1/3,应马上补充。
 
仪器设备校验完毕关机前应实行冲洗(RINSE)操作。

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