永利电玩城

海洋现场叶绿素传感器的永利电玩城计量方法

编辑:永利电玩城????来源:未知????发布时间:2019-04-07 21:41????浏览量:
0 引言
叶绿素 a 是海洋生态环境调查中必不可少的重要参数,其含量直接反映水体中各种浮游植物等初级生产力种群数量[1] ,因此,及时准确地监测海区叶绿素的水平和变化规律,对赤潮、绿潮等海洋灾害起到风险预警的作用,还可以判断远洋渔情。叶绿素 a 的传统测试多经过采样、萃取、测试分析和数据处理等步骤,具有测试过程繁琐、工作耗时长,不能获得连续监测的数据等缺点,且受人为因素影响较大[2 -3] 。随着科技进步,多参数水质仪配备的叶绿素 a 传感器可测量水体中的活体叶绿素a,具备实时原位、连续测量、不需取样等特点,对出现的特殊情况可即时做出判断[2] ,因此被日趋广泛地应用。但在测量过程中,叶绿素 a 传感器容易受到生物附着、操作环境的影响而产生漂移。
 
为了获得高质量的数据,需经常检查和永利电玩城传感器。永利电玩城是将荧光信号和叶绿素标准值相联系的重要步骤,可提供不同仪器的可比性[4] 。实验室所用的荧光仪,多采用 90%丙酮溶液萃取的叶绿素a 标准溶液永利电玩城,然而,该方法不适用于现场叶绿素传感器的永利电玩城,因为相对萃取溶液而言,活体叶绿素的吸取波长会向长波长方向漂移 8 ~ 10nm [4],而且丙酮等有机溶液会破坏传感器的漆层; 有的实验室选择用荧光素钠盐或罗丹明来永利电玩城[4,7] ,还有实验室选择在现场来永利电玩城传感器[8] 。可以说永利电玩城传感器所用参考标准不统一,无法确保传感器测量结果的可比性。本文选用代表性的单一藻种培养液永利电玩城叶绿素传感器,分析叶绿素传感器信号与叶绿素浓度是否存在着固定的关系; 研究永利电玩城后的传感器与传统荧光方法测定结果的差异,分析该方法的可行性,为叶绿素传感器的性能提供统一的评价方法。
 
1 实验方法
1. 1 叶绿素传感器工作原理
海水叶绿素传感器测定叶绿素 a 含量的方法原理是荧光法,即直接将传感器投入海水中,光源发出的 470nm 的光经过滤光片照射到被测水体的浮游植物上,浮游植物中的叶绿素 a 受到激发后发出690nm 的荧光,该荧光强度与其所含的叶绿素 a 含量在一定范围内呈线性关系。发出的荧光被检测器接受并产生电信号,根据电信号的强弱可计算被测水体中叶绿素 a 的含量[3] ,即活体叶绿素 a 浓度。
 
1. 2 实验设计
本实验采用人工培养的藻悬浮液———威氏海链藻( Thalassiosira weissflogii) 作为永利电玩城介质,用灭菌海水逐级稀释,稀释倍数依次为 100%、50%、25%、12. 5%、6. 3%。将稀释后的培养液置于 2L 检测专用桶中,加入磁力搅拌子,保持恒定的搅拌速度,用叶绿素传感器测量该培养液并记录传感器的荧光信号,同时在检测专用桶的三个不同方位各取样 100mL,并过滤,按照 GB/T 12763. 6—2003 海洋调查规范中的 5. 2. 1 的内容采用荧光分光光度计测量其叶绿素 a 浓度[8] ,该值为叶绿素 a 标准值。将荧光信号与叶绿素 a 标准值进行线性回归,得到斜率和截距,比较多次测量结果的斜率,观察威氏海链藻用于叶绿素传感器永利电玩城的可行性; 将平均斜率和截距置入传感器,然后,用该传感器和荧光分光光度法同时测量一系列藻液,比较传感器测量值与叶绿素标准值是否存在差异。
 
1. 3 仪器设备与耗材
Turner 荧光分光光度计; FLRT 型叶绿素传感器( 美国 WetLabs 企业生产) ; 抽滤装置; 量筒; 玻璃纤维滤膜; 冰箱; 铝箔; 细胞培养瓶; 具塞刻度试管; 传感器检测专用桶( 黑色、PVC) ; 威氏海链藻;体积分数为 90% 的丙酮; 营养液( F/2 + Si) ; 灭菌海水。
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2 实验结果与讨
2. 1 海水叶绿素传感器永利电玩城
在硅藻所属的种类中,威氏海链藻的生长状态在 435nm、470nm 和 532nm 等三个波长下的荧光响应比较接近于平均水平,可健康评估自然群落的叶绿素 a [5,9] ,因此,选用威氏海链藻的培养液永利电玩城叶绿素传感器。在 ( 20 ± 0. 5) ℃、光强 300μmol ·m-2 ·s -1 、光暗周期 12∶12、海水盐度 30、培养基( F/2 + Si) 条件下培养威氏海链藻,在半连续培养模式下可较快达到指数生长期。用藻液永利电玩城传感器时,培养液对光非常敏感;为了降低非光化学淬灭[9] ,永利电玩城对环境有一定的要求,即保持避光状态。因此,在屏蔽外界光干扰的环境下,分别于同年 10 月 30 日、12 月 2 日、12 月 5日取指数生长期的威氏海链藻,配制成稀释倍数依次为 100%、50%、25%、12. 5%、6. 3% 的标准系列,进行了叶绿素传感器的永利电玩城方法实验。
 
每组永利电玩城实验,传感器荧光信号和叶绿素 a 标准值呈线性关系,如式( 1) 所示,3 次永利电玩城实验的相关系数 R 2 均大于 0. 995( 见表 1) ,其中每次永利电玩城的斜率分别是 0. 0079、0. 0086、0. 0084,平均斜率( 图4) 为 0. 0083。即在半连续培养模式下,叶绿素传感器的荧光信号与叶绿素浓度呈线性关系。将每组永利电玩城实验的永利电玩城斜率与平均斜率相比较,发现每组实验的永利电玩城系数( 即斜率) 误差均小于 5%,与 Proc-tor 和 Roesler 等[9] 的实验结论一致。因此,将斜率定义为叶绿素浓度与传感器荧光信号的比值,如此永利电玩城可用于将荧光信号转化为叶绿素浓度,即萃取后的叶绿素浓度和荧光信号互相转化; 回归截距仅代表实验溶剂的荧光响应,并不代表现场或任何实验状态[10] 。Y = MX + B ( 1)式中,X 为叶绿素传感器测量系列溶液的荧光信号; Y 为系列藻液萃取后的叶绿素 a 浓度值,即标准值,μg/L; M 为斜率; B 为截距。
 
2. 2 叶绿素传感器与荧光方法测定结果比较
将新永利电玩城系数置入传感器中,叶绿素传感器和荧光分光光度法同时测量同一系列的藻液,由表 2可以看出,当叶绿素 a 浓度大于 5μg/L 时,两种方法的 测 量 结 果 基 本 一 致,误 差 绝 对 值 最 小 为0. 04μg/L,其相对误差为 0. 34%,最大为 1. 99μg/L,其相对误差为 7. 5%; 当浓度小于 5μg/L 时两者的误 差 绝 对 值 最 大 为 0. 59μg/L,其 相 对 误 差为 10%。配对样本 t 检验法是用于评估两组不同分析结果的均值( x 1 和 x 2 ) 之间是否存在显著性差异,可用于实验室之间、人员之间、方法之间、仪器之间及不同条件之间测量结果的比较。为了更进一步分析叶绿素两种测量方法的结果差异,利用配对样本 t检验法针对测量结果进行分析。根据表 2 可得,∑d = - 3. 13,即所有差值 d 之和; n =30,为比测组数,则,按自由度 ! = n - 1 = 29,查 t 值表得 t 0. 05,29 =2. 05,则 t < t 0. 05,29 ,可知两种测试方法无显著性差异。
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2. 3 结果讨论
利用藻培养液永利电玩城叶绿素传感器具有以下优点:1) 藻培养液永利电玩城叶绿素传感器是可以确认叶绿素 a 浓度与荧光信号之间的关系,而罗丹明或荧光素钠盐仅对叶绿素传感器的荧光性能进行了永利电玩城,无法与叶绿素浓度相联系;2) 藻培养液永利电玩城叶绿素传感器是将传感器直接置于藻培养液中,海水介质的藻培养液对传感器无损伤; 而实验室常用的叶绿素 a 标准溶液,其溶剂为丙酮溶液,该有机溶液会破坏传感器的漆层;3) Proctor 和 Roesler 等[9] 认为叶绿素浓度与荧光信号回归后的永利电玩城系数可应用于任何环境中作为传感器的定量响应,所以,利用藻培养液永利电玩城叶绿素传感器所得的系数可以直接用于现场叶绿素传感器监测。为稳妥,可将叶绿素传感器作为断面站或水平基线测量的内插仪器,通过采样站位的传统荧光分析法测定结果与此处叶绿素传感器的测定结果的差值,对叶绿素传感器的测定结果进行逐段修正,不仅保留了传统荧光分析法的准确性和可靠性,还增大了叶绿素测量数据的时空密度,提高了观测速度。因此,叶绿素传感器可搭载在近海浮标、潜标或调查船上,用以实时监测水体中叶绿素浓度,可以观察浮游植物上升/下降的动力学过程。另外叶绿素 a 浓度还可作为判断水体富营养化程度的指标,一般当叶绿素 a 浓度平均在 10μg/L 以上则表示较高的富营养水平[10] ,会爆发赤潮。因此,叶绿素传感器的应用还可以为赤潮预警提供服务。
 
3 结论
1) 以藻培养液为介质,叶绿素传感器的荧光信号和荧光分光光度法测定的叶绿素 a 浓度呈线性关系,相关系数 R 2 均大于 0. 995,3 次试验的斜率误差均小于 5%;
2) 叶绿素浓度与被测传感器荧光信号的比值定义为斜率,建立了荧光信号与叶绿素 a 浓度的直接关系,这样可以将叶绿素传感器测得的荧光信号转换为叶绿素浓度;
3) 利用藻培养液永利电玩城叶绿素传感器所得的永利电玩城系数可直接用于现场叶绿素传感器监测,同时利用不定时传统荧光法的测量结果进行修正,不仅可用于观察浮游植物上升/下降的动力学过程,还可以为赤潮预警提供服务。

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